又名杜爱云、杜云仙，浙江杭州人。全面抗战爆发后，参加浙江省抗日救护大队。后到金华，参加浙江省抗日救亡流动剧团。1938年5月，加入中国共产党。历任中共龙泉小梅区委书记龙泉县自卫大队妇女自卫队队长，龙泉县委妇女部长，处属特委委员等职。1944年春，随处属特委机关一同到缙云。到缙云之初，她和母亲、孩子租住在壶镇溪坪、沈宅、壶镇贤母桥桥西“吕立大”商店等处，以卖雪花膏为掩护做地下工作。1947年6月，杜毅贞兼任中共新建区委书记，主要隐蔽在龙湖郑天叨家做地下工作。10月底，中共闽浙边地委书记陈贵芳去福州向省委汇报工作途中，到缙云联系工作。因傅振军外出，特委委员杜毅贞在缙云县龙湖村郑天叨家热情接待了他，双方通报情况交流了革命经验。

新中国建立后，任浙江省第七军分区司令部政治指导员，丽水地区民主妇女联合会主任，华东地区物资局党总支书记、人事保卫科科长上海市编制委员会调研员，上海市纺织工业局第三医院党支部书记，上海市长宁区妇产科医院党支部书记等职。